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基因擴增儀與DNA復(fù)制的基本要素是一致的
更新時間:2022-08-26   點擊次數(shù):1865次
   基因擴增儀是分子生物學(xué)研究重要的工具,是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)。該儀器是由外殼、變溫反應(yīng)腔、散熱系統(tǒng)、加熱系統(tǒng)、制冷系統(tǒng)、電子控制系統(tǒng)、供電系統(tǒng)、人機界面等各部分組成的,主要用于科研及臨床的基因擴增、定性PCR基因擴增、熒光/酶免終點定量DNA基因擴增、基因芯片等其他基因分析應(yīng)用的基因擴增等。
 
  基因擴增的原理是雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶的作用下,以單鏈為模版,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成新的單鏈,與模版配對成為雙鏈分子挎貝。在體外實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。
 
  基因擴增的基本要素與DNA復(fù)制的基本要素是一致的。
 
  1、DNA模板:待拷貝的DNA稱為模板,它可以是雙鏈DNA也可是單鏈DNA,然后擴增得到的產(chǎn)物是雙鏈狀態(tài)的。
 
  2、引物:是DNA復(fù)制的先鋒,就象結(jié)晶過程中的晶核,引導(dǎo)DNA的合成。在PCR擴增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。
 
  3、DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶):是DNA復(fù)制的動力,在dNTP等底物存在時在引物的引導(dǎo)下沿著模板DNA合成互補的DNA鏈。
 
  4、緩沖液:提供DNA合成反應(yīng)所需的pH,離子強度等環(huán)境。
 
  5、4種單核苷酸:dNTP,提供DNA合成原料。
 
  它可以在試管里建立反應(yīng),經(jīng)過數(shù)小時之后,就能將微量的目的基因或者某一特定的DNA片段擴增數(shù)十萬倍,乃至千百萬倍,而無需通過繁瑣費時的基因克隆程序,便可獲得足夠數(shù)量的精確的DNA拷貝,所以有人亦稱之為無細(xì)胞的分子克隆法。
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